鱼粉是一种重要的蛋白质原料，其安全性问题不能忽略，安全重要体现在是否有药物残留、是否有毒物质残留等，具体可操作的检测指标包括鱼粉的新鲜度、药物残留和卫生指标等。鱼粉的新鲜度差，会严重降低鱼粉是品质，甚至丧失饲用价值。本文着重讨论其中的一项鉴定指标进行检测应用，以挥发性盐基氮含量表示。

　　挥发性盐基氮是指动物性食物由于酶和细菌的作用，在腐败过程中，使蛋白质分解而产生氨以及胺类含氮物质，此类物质具有挥发性，在碱性溶液中蒸出后，用标准酸液滴定从而计算含量，根据此原理，在半微量检测方法的基础上改良，使检测更简易、快捷。

　　1、试剂

　　1.1 1%氧化镁混悬液 分析纯氧化镁1.0g溶于100ml蒸馏水中，振摇成混悬液。

　　1.2 2%硼酸吸收液 分析纯硼酸2g溶于100ml蒸馏水。

　　1.3 0.1mol/L盐酸标准液 吸取分析纯盐酸8.3ml，用蒸馏水定容至1000ml，用无水碳酸钠标定。

　　1.4 0.01ml/L盐酸标准液 用0.1mol/L盐酸标准溶液稀释。

　　1.5 混合指示剂 甲基红0.1%乙醇溶液，溴甲酚绿0.5%乙醇溶液，两溶液等体积混合，阴凉处保存三个月以内。

　　二。实验所用到的仪器

　　2.1 上海梅颖浦黄色污污污网站

　　2.2 型定氮仪

　　2.3 离心机

　　2.4 消化管

　　2.5 滴定管 zui小分度0.01ml

　　3、分析步骤

　　3.1 样品处理

　　取10g鱼粉于250ml锥形瓶中，加100ml(V总)蒸馏水，于黄色污污污网站上搅拌30min，4000转离心。

　　3.2 蒸馏滴定

　　吸取20.0ml2%硼酸吸收液于锥形瓶中，加混合指示剂2~3滴，使KDN-2C型定氮仪的冷凝管末端浸入此溶液。准确吸取10.0ml(V分)上述样品清夜于消化管中，加少量蒸馏水冲洗，再加入10ml1%的氧化镁溶液，蒸馏至150ml(约5min)。吸收液立即用0.01mol/L盐酸标准溶液滴定，溶液由蓝绿色变为灰红色为终点，同时做试剂空白。

　　4、计算

　　挥发性盐基氮(W)以每100g样品含氮毫克数表示。

　　W—样品中挥发性盐基氮的含量，mg/100g

　　V1—测定试样所消耗盐酸标准溶液体积，ml

　　V2—试剂空白消耗盐酸标准溶液体积,ml

　　C—盐酸标准溶液的实际浓度，mol/L

　　14—与1.00mL标准标准滴定溶液[c(HCl)=1.000mol/L]相当的氮的质量，mg

　　m—样品质量，g

　　结果的表述：报告算术平均值的三位有效数。

　　5、允许差

　　相对误差≤10%。

　　6、影响因素

　　6.1 时间

　　VBN的检测反映的是鱼粉的腐败过程所产生的氨以及胺类等碱性含氮物质，因此，离心后的样液应马上检测。作者以粗蛋白含量为65%的进口秘鲁鱼粉为例，对比时间对VBN的影响(见表1)。

　　表1 时间对VBN的影响

　　时间 VBN(mg/100g)

　　2h 175

　　1h 158

　　0.5h 133

　　10min 112

　　5min 106

　　3min 105

　　以上表明，试液应在5min以内进行测定。

　　6.2 温度

　　磁力搅拌过程也要维持一定的温度，温度越高，VBN越大，检验的误差越大。

　　表2 温度对VBN的影响

　　温度 VBN(mg/100g)

　　20℃ 105

　　25℃ 108

　　30℃ 122

　　32℃ 154

　　以上表明，磁力搅拌中控制温度在20~25℃*。

　　7、其他

　　7.1 鱼粉执行质量标准(鱼粉GB T19164-2003)的主要技术参数(表3)

　　表3 鱼粉GB T19164-2003

　　项目 指标

　　特级品 一级品 二级品 三级品

　　粗蛋白(%) ≥65 ≥60 ≥55 ≥50

　　挥发性盐基氮VBN(mg/100g) ≤110 ≤130 ≤150 ≤150

　　7.2 本检测方法可推广应用至其他的动物性蛋白饲料，例如血浆蛋白、血球蛋白等等。